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病毒實驗原理和慢病毒包裝系統介紹

更新時間:2023-04-13點擊次數:1686

  慢病毒是一種有包膜的RNA病毒,直徑為80-120nm,呈二十面體對稱結構、球形。病毒顆粒最外層是包膜(包膜蛋白決定了感染細胞的類型),再往里依次為基質蛋白和衣殼,最里面是兩條相同的正股RNA鏈和酶(逆轉錄酶、整合酶和蛋白酶)。
 
慢病毒實驗原理
慢病毒(Lentivirus)是逆轉錄病毒的一種,基因組為雙鏈RNA。但區別于一般的逆轉錄病毒,慢病毒具有更廣的宿主范圍,對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。
重組慢病毒載體是以HIV-1(人類免疫缺陷I 型病毒)為基礎發展起來的工具載體,其毒性基因已經被剔除并被外源目的基因所取代,屬于假型病毒。(一次性感染能力而無復制產生新病毒能力)
 
將靶基因隨機整合到宿主的基因組中,并且能夠在細胞系中穩定表達若干代,可以進行穩轉細胞株的篩選。被廣泛應用于各種細胞系基因敲除、基因過表達、RNA干擾。
 
 
包裝系統
慢病毒載體包含了包裝、轉染、穩定整合所需要的遺傳信息。
慢病毒包裝質粒可提供轉錄并包裝RNA到重組的假病毒載體所需要的輔助蛋白。
1. 外殼糖蛋白 識別并感染宿主細胞
2. 結構蛋白 病毒復制所需要的酶
慢病毒特點
1. 慢病毒有廣泛的宿主范圍,能夠有效地感染分裂細胞、非分裂細胞,特別適合于一些難轉染的細胞(如原代細胞、干細胞、不分化的細胞)和對腺病毒感染具有較強免疫反應的細胞(如樹突狀細胞、單核細胞和間充質干細胞)等,能大大提高目的基因轉導效率,而且目的基因整合到宿主細胞基因組的幾率大大增加。
 
2. 慢病毒能將外源基因有效地整合入宿主染色體上,介導目的基因穩定、長期的表達。因此,可以利用慢病毒建立穩定細胞株。
 
3. 適用范圍更廣,不僅能用于體外實驗,還能用于活體動物模型,尤其是動物成瘤實驗。


 
慢病毒包裝系統采用的包裝系統是2代包裝系統,即三質粒系統,該系統包括1個包裝質粒(psPAX2)、1 個包膜質粒(pMD2G)、1個目的基因質粒和1株包裝細胞(293T cell)。
 
蘇州阿爾法生物提供細胞培養試劑、細胞培養設備、細胞培養耗材、細胞株、基因編輯細胞株、所提供的CRISPR-Cas9表達病毒具有以下特點:
1、病毒產品現貨提供;
2、可以滿足不同細胞的穩轉的需求;
3、攜帶抗性用于穩轉構建;
4、表達穩定適合用于基因敲除;
了解更多內容請進入蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司咨詢。
慢病毒實驗原理和慢病毒包裝系統介紹
 
慢病毒是一種有包膜的RNA病毒,直徑為80-120nm,呈二十面體對稱結構、球形。病毒顆粒最外層是包膜(包膜蛋白決定了感染細胞的類型),再往里依次為基質蛋白和衣殼,最里面是兩條相同的正股RNA鏈和酶(逆轉錄酶、整合酶和蛋白酶)。
 
 
慢病毒實驗原理
慢病毒(Lentivirus)是逆轉錄病毒的一種,基因組為雙鏈RNA。但區別于一般的逆轉錄病毒,慢病毒具有更廣的宿主范圍,對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。
重組慢病毒載體是以HIV-1(人類免疫缺陷I 型病毒)為基礎發展起來的工具載體,其毒性基因已經被剔除并被外源目的基因所取代,屬于假型病毒。(一次性感染能力而無復制產生新病毒能力)
 
將靶基因隨機整合到宿主的基因組中,并且能夠在細胞系中穩定表達若干代,可以進行穩轉細胞株的篩選。被廣泛應用于各種細胞系基因敲除、基因過表達、RNA干擾。
 
 
包裝系統
慢病毒載體包含了包裝、轉染、穩定整合所需要的遺傳信息。
慢病毒包裝質粒可提供轉錄并包裝RNA到重組的假病毒載體所需要的輔助蛋白。
1. 外殼糖蛋白 識別并感染宿主細胞
2. 結構蛋白 病毒復制所需要的酶
慢病毒特點
1. 慢病毒有廣泛的宿主范圍,能夠有效地感染分裂細胞、非分裂細胞,特別適合于一些難轉染的細胞(如原代細胞、干細胞、不分化的細胞)和對腺病毒感染具有較強免疫反應的細胞(如樹突狀細胞、單核細胞和間充質干細胞)等,能大大提高目的基因轉導效率,而且目的基因整合到宿主細胞基因組的幾率大大增加。
 
2. 慢病毒能將外源基因有效地整合入宿主染色體上,介導目的基因穩定、長期的表達。因此,可以利用慢病毒建立穩定細胞株。
 
3. 適用范圍更廣,不僅能用于體外實驗,還能用于活體動物模型,尤其是動物成瘤實驗。


 
慢病毒包裝系統采用的包裝系統是2代包裝系統,即三質粒系統,該系統包括1個包裝質粒(psPAX2)、1 個包膜質粒(pMD2G)、1個目的基因質粒和1株包裝細胞(293T cell)。
 
  蘇州阿爾法生物提供細胞培養試劑、細胞培養設備、細胞培養耗材、細胞株、基因編輯細胞株、所提供的CRISPR-Cas9表達病毒具有以下特點:
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